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第一章 毒理学实验基础1

第一节 毒理学实验的原则和局限性1

第二节 毒理学毒性评价试验的基本目的3

第三节 动物实验的职业道德4

第四节 实验动物的选择和管理4

第五节 实验动物的准备8

第六节 受试物和样品的准备12

第七节 实验动物染毒途径和技术13

第八节 实验动物生物标本采集及处死19

第九节 毒理学试验的统计学22

第十节 优良实验研究规范32

第二章 一般毒性试验34

第一节 急性毒性试验34

一、经口急性毒性试验34

二、经呼吸道急性毒性试验49

三、经皮肤急性毒性试验50

第二节 局部毒性试验51

第三节 蓄积毒性试验54

第四节 亚慢性和慢性毒性试验55

一、亚慢性毒性试验55

二、慢性毒性试验56

第三章 特殊毒性试验方法59

第一节 致突变实验方法59

一、鼠伤寒沙门菌回复突变试验59

二、哺乳动物细胞基因突变试验63

三、动物骨髓细胞染色体畸变分析68

四、小鼠骨髓细胞微核试验70

五、单细胞凝胶电泳技术72

第二节 致癌试验75

一、哺乳动物细胞体外恶性转化试验76

二、哺乳动物短期致癌试验78

三、哺乳动物长期致癌试验79

第三节 发育毒性和致畸作用试验80

一、三段生殖毒性试验81

二、大鼠体外全胚胎培养试验86

第四章 血液毒理学研究方法92

第一节 特殊血液学检测92

一、网织红细胞计数92

二、红细胞渗透脆性试验93

三、高铁血红蛋白含量测定93

四、变性珠蛋白小体测定(煌焦油蓝沉淀法)94

五、血液细胞的化学染色95

六、血液细胞的免疫细胞化学染色96

七、免疫细胞表面标志的检测96

八、血液细胞凋亡的检测97

九、细胞遗传学和分子生物学检测97

第二节 血液和骨髓毒物筛选试验98

一、骨髓造血细胞的体外培养98

二、体内试验-白血病实验动物模型98

二、接触外源化学物的剂量、途径和时间100

一、实验动物的选择100

第五章 免疫毒理学研究方法100

第一节 免疫毒性研究实验设计100

三、重视局部免疫功能的检测101

第二节 免疫抑制检测方法102

一、体液免疫功能测定(溶血空斑试验)102

二、淋巴细胞增殖试验(MTT比色法)103

三、细胞免疫功能测定(皮肤迟发型超敏反应，DTH)105

四、NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶释放法)106

一、皮肤超敏反应测定107

第三节 超敏反应检测方法107

二、呼吸道超敏反应测定108

三、腘窝淋巴结试验108

第六章 生殖毒理学研究方法110

第一节 生殖毒性试验110

一、一代生殖毒性试验110

二、两代(多代)生殖毒性试验112

第二节 环境雌激素检测113

一、大鼠子宫增重试验113

二、雌激素受体结合试验114

三、MCF-7细胞增殖试验115

第三节 精子动力学研究116

第四节 性激素水平分析118

一、血清、睾丸/卵巢组织匀浆液中FSH含量测定118

二、尿液中FSH含量测定119

三、尿液中β-hCG含量测定121

第七章 神经毒理学研究方法124

第一节 迟发性神经毒性试验124

一、通路示踪法125

第二节 神经毒理学形态学方法125

二、化学神经解剖法128

第三节 神经毒理学生理学方法——神经递质定量测定130

第四节 神经毒理学分子生物学方法131

一、神经丝蛋白免疫印迹法131

二、神经丝mRNA含量测定134

第五节 电生理实验方法：膜片钳136

一、行为畸胎学测试组合138

第六节 行为致畸毒性测试方法138

二、行为畸胎学研究组合141

第八章 呼吸毒理学研究方法147

第一节 肺功能测定147

第二节 在体BAL与BALF分析148

第三节 体外IPL与分析150

第四节 胎鼠肺细胞原代培养与上皮细胞纯化151

第九章 肝脏毒理学研究方法153

第一节 肝损害的体内评价方法153

一、血清酶活性测定153

二、肝脏排泄功能测定155

三、肝脏分泌功能测定158

四、肝纤维化测定160

第二节 肝损害的体外评价方法162

一、体外离体肝灌流与分析162

二、大鼠肝细胞原代培养实验方法164

一、小鼠急性肝损伤模型166

第三节 化学性肝损伤动物模型166

二、大鼠慢性肝损伤模型167

三、小鼠免疫性肝损伤模型168

第十章 肾脏毒理学研究方法170

第一节 体内实验170

一、尿液的一般生化指标170

二、肾脏血流动力学和血流量分析171

三、肾小球滤过率和肾脏清除率测定172

四、肾脏的微穿刺和微灌注技术与应用177

五、电子探针显微分析法179

第二节 体外试验180

一、体外细胞培养与细胞毒性试验180

二、肾膜囊泡的分离与应用180

第十一章 心血管毒理学研究方法182

第一节 心血管毒理学动物实验研究方法182

第二节 心功能评价方法183

一、心肌细胞原代培养184

第三节 心脏毒性体外评价方法184

二、细胞增殖试验185

三、DNA含量及细胞周期分析186

第四节 细胞凋亡与坏死检测186

一、形态学测定方法186

二、琼脂糖凝胶电泳方法187

三、酶联免疫分析方法188

四、流式细胞仪检测方法189

一、动物皮肤刺激试验190

第一节 皮肤刺激/腐蚀实验190

第十二章 皮肤毒理学研究方法190

二、人体皮肤刺激试验191

第二节 皮肤致敏和光敏试验194

一、皮肤变态反应试验194

二、皮肤光毒和光变态反应试验198

第三节 皮肤吸收试验199

一、在体皮肤吸收试验199

二、离体皮肤吸收试验200

参考文献202